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新聞(wen)詳情

塔卡里伯病毒PCR檢測試劑盒說明書

發表(biao)時間:2024-04-29 13:20

                                       塔卡里(li)伯病毒PCR檢(jian)測試劑盒說明書(shu)

使用方(fang)法:

測定法的(de)靈敏度來自作為(wei)報(bao)告的(de)酶。酶是一種(zhong)有機(ji)催化劑(ji),很(hen)少量的(de)酶即(ji)可誘導大(da)量的(de)催化反應(ying),產生可供觀察的(de)顯色反應(ying)現(xian)象。因此該(gai)體(ti)系常被稱為(wei)酶放(fang)大(da)體(ti)系。

1. 標(biao)(biao)準(zhun)品的稀(xi)(xi)釋:本試劑盒提供原倍標(biao)(biao)準(zhun)品一支,用戶(hu)可(ke)按照下列(lie)圖(tu)表在小(xiao)試管中進(jin)行稀(xi)(xi)釋。   24μg/ml    5號標(biao)(biao)準(zhun)品    150μl的原倍標(biao)(biao)準(zhun)品加入(ru)150μl標(biao)(biao)準(zhun)品稀(xi)(xi)釋液

12μg/ml    4號標(biao)準(zhun)品(pin)    150μl的5號標(biao)準(zhun)品(pin)加入150μl標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液

6μg/ml     3號標(biao)(biao)準(zhun)品    150μl的4號標(biao)(biao)準(zhun)品加入150μl標(biao)(biao)準(zhun)品稀釋液

3μg/ml     2號(hao)(hao)標(biao)準品    150μl的3號(hao)(hao)標(biao)準品加入(ru)150μl標(biao)準品稀釋液(ye)

1.5μg/ml   1號(hao)標準(zhun)(zhun)品(pin)    150μl的(de)2號(hao)標準(zhun)(zhun)品(pin)加入150μl標準(zhun)(zhun)品(pin)稀釋(shi)液

2. 加樣(yang)(yang):分別設(she)空白孔、標準孔、待測(ce)(ce)(ce)樣(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)孔。在酶標包被板上(shang)標準品(pin)(pin)(pin)準確加樣(yang)(yang)50μl,待測(ce)(ce)(ce)樣(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)孔中先加樣(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)稀釋液40μl,然后再加待測(ce)(ce)(ce)樣(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)10μl(樣(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)終稀釋度(du)為5倍)。加樣(yang)(yang)將樣(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)加于酶標板孔底(di)部,盡量不(bu)觸(chu)及(ji)孔壁,輕輕晃(huang)動(dong)混勻。|

3. 溫育:用封(feng)板膜(mo)封(feng)板后置(zhi)37℃溫育30分(fen)鐘。   

4. 配液:將(jiang)30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌(di):小心揭掉(diao)封板膜,棄去液體(ti),甩干,每孔加滿洗滌(di)液,靜置30秒后棄去,如(ru)此重復5次,拍干。

6. 加酶(mei):每孔加入酶(mei)標試劑50μl,空(kong)白孔除(chu)外。

7. 溫育(yu):操作同3。

8. 洗滌:操作(zuo)同5。

9. 顯(xian)色(se):每孔先加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)劑(ji)A50μl,再(zai)加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)劑(ji)B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯(xian)色(se)15分鐘.

10. 終(zhong)止(zhi):每孔加終(zhong)止(zhi)液50μl,終(zhong)止(zhi)反(fan)應(此時藍色(se)立轉黃色(se))。

11. 測定:以空白空調(diao)零(ling),450nm波長依序(xu)測量(liang)各孔的吸光度(du)(OD值)。 測定應在加終(zhong)止液后15分鐘(zhong)以內進行。


實驗規則:


1、要保證(zheng)移(yi)液槍(qiang)的準確性,誤差不能超過2%。可用水和(he)電子天平(ping)進行(xing)確定。但有(you)專(zhuan)業人(ren)員進行(xing)矯正。

2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍(qiang)各一支。吸取不同的液(ye)體后,要更(geng)換槍(qiang)頭。即使(shi)是吸取標準品時(shi)。

3、要在實(shi)驗前1小時將(jiang)試(shi)劑盒從冰(bing)箱中取(qu)出,使各種試(shi)劑都(dou)恢復到室溫,以使結果更穩定。

4、實驗時(shi),要(yao)使底物避光(guang)保(bao)存。

5、用槍(qiang)吸(xi)取液體(ti)時速度不能太快(kuai),以免產生氣泡而使吸(xi)取量不準確。

6、吸(xi)取液體(ti)時,要用量程和需要量接近的槍去吸(xi),減少誤差。

7、將液體加(jia)到酶標孔中(zhong)時,避免槍頭和(he)孔內液體接(jie)(jie)觸,可(ke)使(shi)槍頭上(shang)的液滴(di)和(he)孔壁接(jie)(jie)觸,液滴(di)會自然流下去。

8、液體(ti)(ti)全部加完后(hou),可將酶標板在(zai)桌子上平行輕輕晃(huang)動30秒,混勻液體(ti)(ti)。也可以用酶標儀的(de)晃(huang)動功(gong)能。

9、應盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數(shu)據的準確性。

10、對(dui)結(jie)果有疑問(wen)的(de)樣品要用其它方法進行(xing)確證。


實驗注意事項(xiang):


1)RT-PCR可(ke)以檢測(ce)組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本(ben)(ben)有不同要(yao)求,實驗(yan)前(qian)請充(chong)分溝(gou)通確(que)認實驗(yan)方(fang)案(an)和樣本(ben)(ben)情(qing)況;


2)客戶盡(jin)可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱(cheng)和ID號(hao);


3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。


4)樣(yang)本保存于液氮(dan)或干冰,也(ye)可以保存于Trizol液中。


實(shi)時熒(ying)光定(ding)(ding)(ding)量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指(zhi)在PCR反應體(ti)系中加(jia)入熒(ying)光基團,利用(yong)(yong)熒(ying)光信號積(ji)累實(shi)時監測整個PCR進(jin)程,*通過標(biao)準曲線對(dui)未知模板進(jin)行定(ding)(ding)(ding)量分(fen)析的方(fang)法。實(shi)時熒(ying)光定(ding)(ding)(ding)量PCR的化(hua)學原理(li)包(bao)括(kuo)探(tan)針類和非(fei)探(tan)針類兩類,探(tan)針類是利用(yong)(yong)與靶細(xi)胞序(xu)列特異(yi)(yi)性雜交的探(tan)針來指(zhi)示擴(kuo)增(zeng)(zeng)產物的增(zeng)(zeng)加(jia),非(fei)探(tan)針類是利用(yong)(yong)熒(ying)光染料或者特異(yi)(yi)性設計(ji)的引物來指(zhi)示擴(kuo)增(zeng)(zeng)的增(zeng)(zeng)加(jia)。運用(yong)(yong)該技術可以對(dui)DNA、RNA樣品進(jin)行定(ding)(ding)(ding)量(包(bao)括(kuo)*定(ding)(ding)(ding)量和相(xiang)對(dui)定(ding)(ding)(ding)量)和定(ding)(ding)(ding)性分(fen)析。


主要服(fu)務:DNA或RNA的*定量分(fen)析(xi)(xi)、基因表達(da)差異分(fen)析(xi)(xi)、基因分(fen)型(xing)。


主要技術(shu):引物(wu)設計、RNA提取、cDNA合成(cheng)、qPCR。


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正(zheng)品(pin)保障

確保(bao)所有產(chan)品(pin)都(dou)是(shi)原裝正品(pin)

優質服務

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安全包裝(zhuang)

統一包裝,保障產品安(an)全運輸(shu)

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