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12-HETE Elisa Kit 
12-HETE Elisa Kit
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英文名稱 : Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid, 12-HETE Elisa Kit
貨號 : EY-00H1327
規格 : 96T/48T
品牌 : 上(shang)海一研(yan)
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12-HETE Elisa Kit原理(li):

ELISA試(shi)劑盒是固相(xiang)夾心(xin)法(fa)酶(mei)(mei)聯免疫(yi)吸附實(shi)驗(ELISA).已知(zhi)待測物質(zhi)濃(nong)度(du)的(de)(de)標(biao)準品(pin)、未知(zhi)濃(nong)度(du)的(de)(de)樣品(pin)加(jia)(jia)入微(wei)孔酶(mei)(mei)標(biao)板內進行檢(jian)測。先將待測物質(zhi)和(he)生(sheng)物素標(biao)記(ji)的(de)(de)抗體(ti)同時溫(wen)育(yu)。洗(xi)滌后(hou),加(jia)(jia)入親和(he)素標(biao)記(ji)過的(de)(de)HRP。再經(jing)過溫(wen)育(yu)和(he)洗(xi)滌,去除(chu)未結合的(de)(de)酶(mei)(mei)結合物,然后(hou)加(jia)(jia)入底物A、B,和(he)酶(mei)(mei)結合物同時作(zuo)用。產生(sheng)顏色(se)。顏色(se)的(de)(de)深淺和(he)樣品(pin)中待測物質(zhi)的(de)(de)濃(nong)度(du)呈(cheng)比例關系。

12-HETE Elisa Kit 組成:

序號(hao)

名稱

規格

1

酶標包被板

96 孔*1 可(ke)拆卸板

2

酶結合物

10ml*1

3

標(biao)準品

1ml*6

4

緩沖液(ye)

6ml*1

5

顯(xian)色劑 A 液

6ml*1

6

顯色劑(ji) B 液

6ml*1

7

終止液

6ml*1

8

濃縮(suo)洗滌液(*100)

50ml*1 瓶(ping)

9

封板膜

1

10

使用說明書

1

自備材料(liao)

1)蒸餾水。

2)加樣器(qi):5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3)振蕩器(qi)及磁力攪拌器(qi)等。

12-HETE Elisa Kit 標本要(yao)求

1.標本采集后盡早進(jin)行提取,提取按相關文獻進(jin)行,提取后應盡快進(jin)行實(shi)驗(yan)。若不能馬上進(jin)行試驗(yan),可將(jiang)標本放于-20℃保存,但應避免(mian)反復凍融

2.不(bu)能檢測含(han) NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guo)氧化物酶的(HRP)活(huo)性。

2.操作(zuo)步(bu)驟

1.編號:將樣品對(dui)(dui)應微孔(kong)按序編號,每(mei)板應設陰(yin)性對(dui)(dui)照 2 孔(kong)、陽性對(dui)(dui)照2 孔(kong)、空白對(dui)(dui)照 1

孔(空白對照孔不(bu)加樣品及酶標試(shi)劑,其余各步(bu)操(cao)作相同)

2.加(jia)樣(yang):分別在(zai)陰(yin)(yin)、陽性(xing)對照(zhao)孔中(zhong)加(jia)入陰(yin)(yin)性(xing)對照(zhao)、陽性(xing)對照(zhao) 50μl。然后在(zai)待(dai)測樣(yang)品(pin)孔先加(jia)樣(yang)品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye) 40μl,然后再加(jia)待(dai)測樣(yang)品(pin) 10μl。加(jia)樣(yang)將樣(yang)品(pin)加(jia)于(yu)酶(mei)標(biao)板孔底部,盡(jin)量不(bu)觸(chu)及孔壁,輕(qing)輕(qing)晃動混勻(yun),

3.溫(wen)育:用封板(ban)膜封板(ban)后(hou)置 37℃溫(wen)育 30 分鐘。

4.配液:將 30 倍(bei)(bei)濃(nong)縮(suo)洗滌液用蒸(zheng)餾水 30 倍(bei)(bei)稀釋(shi)后備用

5.洗滌:小心揭掉封板(ban)膜(mo),棄去液(ye)體,甩(shuai)干,每孔(kong)加滿洗滌液(ye),靜置(zhi) 30 秒(miao)后棄去,如此重(zhong)復(fu) 5 次,拍干。

6.加酶:每孔(kong)(kong)加入酶標試劑 50μl,空(kong)白孔(kong)(kong)除外。

7.溫育:操(cao)作同 3。

8.洗滌:操作同 5。

9.顯色(se):每(mei)孔(kong)先加(jia)入顯色(se)劑 A50μl,再加(jia)入顯色(se)劑 B50μl,輕輕震蕩混勻(yun),37℃避光顯色(se)10 分(fen)鐘.

10.終(zhong)止:每孔加終(zhong)止液 50μl,終(zhong)止反應(ying)(此(ci)時(shi)藍色(se)立轉黃色(se))。

測定:以(yi)空白(bai)空調零,450nm 波長依(yi)序測量(liang)各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終(zhong)止液后 15 分鐘以(yi)內進行。

12-HETE Elisa Kit 數據計(ji)算

1. 繪制標(biao)準曲(qu)線:各標(biao)準品 OD 值減去(qu)底色即減去(qu)空白孔 OD 值,以(yi) 6 個標(biao)準

品(pin)的(de) OD 值為(wei)(wei)縱坐(zuo)標(biao)(biao) y,以(yi)標(biao)(biao)準品(pin)的(de)濃度為(wei)(wei)橫坐(zuo)標(biao)(biao) x,繪制(zhi)曲線圖(tu),如(ru)圖(tu)示(shi),

并計算出(chu)回(hui)歸方(fang)程 y=ax+b。

2. 將待測樣(yang)品(pin)的 OD 值代入方程式(shi),計(ji)算(suan)各組樣(yang)品(pin)濃度,再(zai)乘(cheng)以稀釋倍數,即

為樣品(pin)的(de)實際 ABP 濃度(du)。

3. 敏感度:1.0 pg/ml

圖片1.png

注意事(shi)項:

1. 實(shi)驗操作(zuo)中必須使用(yong)一次(ci)性吸頭,避免交叉污染。

2. 加(jia)樣:加(jia)樣時(shi),要控制加(jia)樣速度(du),避免(mian)**孔(kong)與最后一(yi)孔(kong)間(jian)(jian)(jian)的時(shi)間(jian)(jian)(jian)間(jian)(jian)(jian)隔過大,否(fou)則將會導(dao)致不(bu)同的預孵育時(shi)間(jian)(jian)(jian),從而(er)影響(xiang)

實驗的準確性(xing)以及重復性(xing)。

3. 孵育:嚴格按照說明書上規定(ding)的孵育時間和溫度進行。

4. 反(fan)應(ying)時間的(de)控制:加入底物后請定時觀察反(fan)應(ying)孔(kong)的(de)顏色變化,如果顏色較深(shen),請提前加入終止液終止反(fan)應(ying)。

5. 建議實(shi)驗前(qian)預測(ce)樣(yang)品(pin)含量,如樣(yang)品(pin)濃度過高(gao),應對樣(yang)品(pin)進行(xing)稀(xi)釋,計算結果時乘以相(xiang)應的稀(xi)釋倍數。

6. 建議(yi)使(shi)用本試劑盒時(shi)先(xian)做預實驗(即(ji)先(xian)做標準(zhun)曲(qu)線(xian),試用幾個標本),如果(guo)對本試劑盒有任何疑問,可和所(suo)購經(jing)銷商(shang)聯系(xi),

如果因(yin)運輸過程導致試劑盒失效,可要(yao)求調換,但概(gai)不承擔產品(pin)本身以外的任何(he)損失。

12-HETE Elisa Kit安全性(xing)

1. 避免人體直接(jie)接(jie)觸顯(xian)色劑A、B和(he)終止液(ye)。一旦接(jie)觸到(dao)這些液(ye)體,請(qing)盡(jin)快用(yong)水沖洗。

2. 實驗中(zhong)不要進(jin)食、抽(chou)煙或使用化妝品。

3. 不要用(yong)嘴吸取試(shi)劑(ji)盒里的任何(he)成份。

保存條件及有效期:

1.試劑(ji)盒保(bao)存:2-8℃

2.有效期:6個(ge)月(yue)


買家數量成交時間
正品保障

確保所有產品(pin)都是原裝正品(pin)

優質服務

優質服務,售后無憂

安全包裝

統一包裝(zhuang),保障(zhang)產品安全運輸

正規發票

機打發票,附箱送達

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