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牛(Bovine)輪狀病毒 IgY 抗體(RV-IgY-Ab) ELISA 檢測(ce)試劑(ji)盒 
牛(Bovine)輪狀病毒 IgY 抗體(RV-IgY-Ab) ELISA 檢測試劑盒
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英文名稱 : Bovine RV-IgY-Ab ELISA Kit
貨號 : EY-L5331
規格 : 96T
品牌 : 一研
價格 :
1860.00
 
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用(yong)途:本試劑(ji)盒僅供科研使(shi)用,定量檢測細胞液、體(ti)液、組織、血(xue)(xue)清、血(xue)(xue)漿等(deng)標(biao)本中大(da)鼠溶血磷脂酰(xian)膽堿(LPC)的含量。

原理:

采用(yong)雙抗體(ti)夾心法(fa)測(ce)定MTHFD2水平。用純(chun)化(hua)的MTHFD2抗體包被微孔板,制成固相載(zai)

體(ti),實驗(yan)時(shi)依次(ci)在微孔板中(zhong)加入樣(yang)本及標準(zhun)品(pin)(pin),并(bing)加入 HRP 標記的(de) ABP 抗(kang)(kang)體(ti),形(xing)成(cheng)抗(kang)(kang)體(ti)-抗(kang)(kang)原-酶標抗(kang)(kang)體(ti)復合(he)物,反復洗滌后加底物 TMB 顯(xian)色(se)(se)。TMB 在過氧化物酶的(de)催化下轉化為藍色(se)(se),再用硫酸終止反應(ying),轉變成(cheng)黃色(se)(se)。顏色(se)(se)的(de)深(shen)淺和(he)樣(yang)品(pin)(pin)中(zhong)的(de) ABP含量(liang)呈正(zheng)相關。采用酶標儀在 450nm 波長測(ce)定吸光度(OD 值),根據標準(zhun)曲(qu)線,計算測(ce)試樣(yang)品(pin)(pin)中(zhong) ABP 濃度。

試劑盒組成:


1

30 倍濃(nong)縮洗滌(di)液

20ml×1 瓶(ping)

7

終止液

6ml×1 瓶(ping)

2

酶標試劑

6ml×1瓶

8

陽性(xing)對(dui)照

0.5ml×1 瓶

3

酶標包被板

12 孔(kong)×8 條

9

陰性對照

0.5ml×1 瓶(ping)

4

樣品稀(xi)釋液

6ml×1 瓶(ping)

10

說明書

1 份(fen)

5

顯色劑(ji) A 液

6ml×1 瓶(ping)

11

封板膜

2 張

6

顯色劑(ji) B 液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1 個(ge)


實驗材料與試(shi)劑配制:

1. 儀器(qi)(qi)與材料(liao):酶標儀(使用前預熱30分鐘),微(wei)量加液器(qi)(qi)、吸頭(tou)、蒸餾水(shui)(shui)或去離子(zi)水(shui)(shui),濾紙。

2. 緩沖(chong)液(ye)使(shi)用(yong):加5ul 的(de)緩沖(chong)液(ye)于(yu)(yu)50ul 的(de)樣品(pin)中(zhong),如果(guo)樣品(pin)量不夠或者(zhe)不確(que)定,緩沖(chong)液(ye)和樣品(pin)的(de)混(hun)合比(bi)例不要(yao)小于(yu)(yu)1:10即可。

混勻,靜(jing)置1小時備(bei)用(如(ru)果標本是血清或者血漿,此步驟忽略)。

3. 洗液的配(pei)制:按1:100的比例(li)配(pei)制洗液備用(yong)。

樣(yang)品收集、處理及保(bao)存:

1. 細胞培養上清:適用于檢測體外培養的細胞分(fen)泌性成份。用無(wu)菌(jun)管(guan)收集細胞上清液,以1000×g離心(xin)15分(fen)鐘,收集上清。

2. 細(xi)胞:用PBS反復洗滌細(xi)胞3次,調整細(xi)胞濃度達到104

-106/ml 左右,通過反復凍融,使(shi)細胞破壞并(bing)放出細胞內成(cheng)份,或

者細胞超聲粉碎,離心取上(shang)清液(ye)檢測。

3. 血(xue)清:在室溫(wen)下,血(xue)液(ye)自然凝固,以(yi)1000×g離心15分(fen)鐘(zhong),取上(shang)清待(dai)測。

4. 血(xue)漿:應根(gen)據標本的要求(qiu)選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為(wei)抗凝劑,混合(he)后(hou)靜(jing)置(zhi)10-20 分(fen)鐘(zhong)后(hou),以(yi)1000×g離(li)心15分(fen)鐘(zhong),收集(ji)上清。

5. 體(ti)液:包(bao)括胸(xiong)腹水(shui)、腦脊液,分(fen)泌(mi)物(wu)等。使(shi)用不含(han)熱原(yuan)和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分(fen)鐘,收集上清。

6. 組(zu)織(zhi)(zhi)標本(ben):切取(qu)(qu)組(zu)織(zhi)(zhi)標本(ben),稱取(qu)(qu)重(zhong)量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻(yun)漿(jiang)器,或超聲破(po)碎儀將標本(ben)勻(yun)漿(jiang),以2000-3000

rmp離心(xin)20 分鐘,收集上清進(jin)行檢(jian)測。

7. 樣(yang)品中(zhong)不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

8. 保存(cun):如果(guo)樣品不能立即檢測,應(ying)將其(qi)分(fen)裝,-70 ℃保存(cun),避(bi)免反復(fu)冷(leng)凍。保存(cun)過(guo)程中如出現(xian)沉淀,應(ying)再(zai)次離心。血液標(biao)

本盡可能的不(bu)要使用溶血(xue)或高血(xue)脂血(xue)。如果血(xue)清中含大量顆粒,檢測前先離心(xin)或過濾。不(bu)要在37℃或更高的溫度加熱(re)解(jie)

凍(dong)。應在(zai)室溫下解凍(dong)并確保樣品均勻(yun)地充分(fen)解凍(dong)。

操作步驟:

1. 取(qu)出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。

2. 分(fen)(fen)組:取出(chu) 96 孔板,根據待測樣品數(shu)量加上標準(zhun)(zhun)品的數(shu)量決定所需的板條數(shu),把剩(sheng)余的板條繼續(xu)冷藏處理。分(fen)(fen)別設標準(zhun)(zhun)

品組(6 個濃(nong)度)、空(kong)白孔、待測(ce)樣品組。

注:為減少(shao)實(shi)驗(yan)誤差,保(bao)證(zheng)準確性,建議設置(zhi)復(fu)孔(kong)。

3. 加(jia)(jia)樣:依照標(biao)準(zhun)品的順序分(fen)別加(jia)(jia)入(ru)(ru) 50ul 的標(biao)準(zhun)品溶液(ye)于空(kong)白微孔中;空(kong)白對(dui)照孔加(jia)(jia)入(ru)(ru) 50ul 的蒸餾水;其余(yu)微孔中加(jia)(jia)入(ru)(ru) 50ul

的(de)待(dai)測樣(yang)本。

4. 加(jia)酶標溶液:標準品組(zu)、待測樣本(ben)組(zu)各(ge)孔(kong)中加(jia)入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔(kong)除外)。

5. 溫(wen)育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內于 37℃恒溫(wen)孵育 1 小時。

6. 洗(xi)板:用(yong)稀釋(shi)后的洗(xi)滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充(chong)分清洗(xi)酶標板 5 次,用(yong)吸水紙徹(che)底拍干。

7. 顯色:各孔(kong)加入(ru)顯色劑(ji) A 液 50ul 后,再(zai)加入(ru)顯色劑(ji) B 液 50ul。

8. 終止:25-37℃下避光反應 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。

9. 讀(du)板(ban):在 450nm 波長讀(du)取各孔的 OD 值。

注(zhu)意事項:

1. 實驗(yan)操作中必(bi)須使用一(yi)次性吸頭,避免交叉污染。

2. 加樣(yang):加樣(yang)時(shi),要(yao)控(kong)制加樣(yang)速度,避(bi)免**孔與最(zui)后(hou)一孔間的時(shi)間間隔過大(da),否則將會導致不同的預孵育時(shi)間,從而(er)影(ying)響

實驗的準確性以及重復性。

3. 孵(fu)育:嚴(yan)格按照說明書上規定的孵(fu)育時(shi)間(jian)和溫度進行。

4. 反(fan)應(ying)時(shi)間(jian)的控制:加(jia)入(ru)底物后請定時(shi)觀察(cha)反(fan)應(ying)孔(kong)的顏色(se)變化(hua),如果顏色(se)較深,請提前加(jia)入(ru)終止液終止反(fan)應(ying)。

5. 建議實驗前(qian)預(yu)測樣(yang)(yang)品(pin)含量(liang),如(ru)樣(yang)(yang)品(pin)濃度過高,應對樣(yang)(yang)品(pin)進行稀釋,計算結果時(shi)乘以相應的稀釋倍數。

6. 建議使用(yong)本試(shi)(shi)劑盒時先(xian)做(zuo)預實驗(即先(xian)做(zuo)標準曲線,試(shi)(shi)用(yong)幾個標本),如果對本試(shi)(shi)劑盒有任何疑問,可和所(suo)購經銷(xiao)商聯系,

如(ru)果因運輸過程(cheng)導致(zhi)試劑盒(he)失(shi)(shi)效,可要(yao)求(qiu)調換,但概(gai)不承(cheng)擔產品本身以外的(de)任(ren)何損失(shi)(shi)。

性能

1. 靈敏度(du)(du)(du):最小(xiao)的(de)檢測濃度(du)(du)(du)小(xiao)于(yu)1號(hao)標(biao)準品。稀釋度(du)(du)(du)的(de)線性。樣品線性回(hui)歸與(yu)預(yu)期濃度(du)(du)(du)相關系(xi)數R值為0.990。

2. 特異性:不(bu)與其它細胞因子反(fan)應。

3. 重(zhong)復性:板內、板間變異系數均小(xiao)于10%。

結(jie)果(guo)判斷與分(fen)析

1、儀(yi)器(qi)值:于波長450nm的(de)(de)酶標儀(yi)上讀取(qu)各孔的(de)(de)OD值

2、以吸光度OD值(zhi)為(wei)縱坐(zuo)標(Y),相(xiang)應(ying)的(de)待(dai)測物質標準品(pin)濃度為(wei)橫(heng)坐(zuo)標(X),做得相(xiang)應(ying)的(de)曲線(xian),樣品(pin)的(de)待(dai)測物質含量可(ke)根據其(qi)OD值(zhi)由標準曲線(xian)換(huan)算出相(xiang)應(ying)的(de)濃度。





買家選項??信息數量成交時間
正(zheng)品保障(zhang)

確保所有產品都是原(yuan)裝(zhuang)正品

優質服務

優質服務,售后無憂

安全(quan)包裝

統一包(bao)裝,保(bao)障產品安全運(yun)輸

正規發票(piao)

機打發票,附箱送達

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