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牛病毒性腹瀉病毒IgY抗體(BVDV IgY)酶聯免疫分析(xi) 試劑盒 
牛病毒性腹瀉病毒IgY抗體(BVDV IgY)酶聯免疫分析 試劑盒
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英文名稱 : BVDV IgY Elisa Kit
貨號 : EY-L0190
規格 : 48T/96T
品牌 : 上海(hai)一(yi)研
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用途:本試劑盒僅(jin)供科(ke)研使用,定量(liang)檢測細胞液、體液、組織、血清、血漿等標本中大鼠(shu)溶血磷脂酰膽堿(LPC)的含量。

原理:

采用雙抗(kang)體夾(jia)心法測(ce)定MTHFD2水平。用純(chun)化的MTHFD2抗體包被微(wei)孔板,制(zhi)成(cheng)固相載

體(ti)(ti),實驗(yan)時依次(ci)在(zai)(zai)微孔板中加入樣本及標準品,并加入 HRP 標記(ji)的(de) ABP 抗(kang)體(ti)(ti),形成抗(kang)體(ti)(ti)-抗(kang)原(yuan)-酶標抗(kang)體(ti)(ti)復合物,反復洗滌后加底物 TMB 顯色(se)。TMB 在(zai)(zai)過氧化(hua)(hua)物酶的(de)催化(hua)(hua)下轉(zhuan)化(hua)(hua)為(wei)藍色(se),再用硫(liu)酸(suan)終止反應,轉(zhuan)變成黃色(se)。顏色(se)的(de)深淺和(he)樣品中的(de) ABP含量(liang)呈正相關。采(cai)用酶標儀(yi)在(zai)(zai) 450nm 波長(chang)測定(ding)吸光度(OD 值),根據標準曲線,計(ji)算測試樣品中 ABP 濃度。

試劑盒組(zu)成:


1

30 倍(bei)濃縮洗滌液

20ml×1 瓶

7

終止液

6ml×1 瓶

2

酶標試劑

6ml×1瓶

8

陽性對照

0.5ml×1 瓶

3

酶標(biao)包被板

12 孔×8 條

9

陰性對(dui)照(zhao)

0.5ml×1 瓶

4

樣品(pin)稀釋液(ye)

6ml×1 瓶

10

說明書

1 份

5

顯色(se)劑 A 液

6ml×1 瓶(ping)

11

封板膜

2 張

6

顯色劑 B 液

6ml×1/瓶(ping)

12

密封袋

1 個(ge)


實驗材料與試劑配(pei)制:

1. 儀(yi)器與(yu)材料:酶(mei)標儀(yi)(使用前(qian)預(yu)熱30分鐘),微量加液器、吸頭(tou)、蒸餾水(shui)或去離(li)子水(shui),濾紙。

2. 緩(huan)沖液使(shi)用:加5ul 的緩(huan)沖液于50ul 的樣品中(zhong),如果樣品量不(bu)夠(gou)或者(zhe)不(bu)確定(ding),緩(huan)沖液和樣品的混合比例(li)不(bu)要小于1:10即可。

混勻,靜置1小時備(bei)用(如(ru)果標本是血(xue)(xue)清(qing)或者血(xue)(xue)漿,此(ci)步驟(zou)忽(hu)略)。

3. 洗液(ye)的配制(zhi):按1:100的比例配制(zhi)洗液(ye)備用。

樣品收集、處理及保存:

1. 細(xi)胞(bao)培養(yang)上清:適用(yong)于檢測體外培養(yang)的細(xi)胞(bao)分泌性成份。用(yong)無菌管收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)上清液,以1000×g離心(xin)15分鐘(zhong),收(shou)集(ji)上清。

2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104

-106/ml 左右(you),通過反復凍融,使細胞(bao)破壞并(bing)放(fang)出(chu)細胞(bao)內(nei)成份,或

者細胞超(chao)聲粉碎,離(li)心取(qu)上清液檢測。

3. 血清(qing):在室(shi)溫下,血液自然凝固(gu),以(yi)1000×g離心15分鐘,取上清(qing)待測。

4. 血(xue)漿:應根據標本的要求選擇EDTA 或檸(ning)檬(meng)酸鈉作為抗凝劑,混合后靜(jing)置10-20 分鐘(zhong)后,以1000×g離心15分鐘(zhong),收集上清。

5. 體(ti)液(ye):包括(kuo)胸腹水、腦脊液(ye),分泌物等。使用(yong)不含熱(re)原(yuan)和內毒素的離心(xin)管收集,以1000×g離心(xin)15分鐘,收集上清。

6. 組(zu)織標本:切取組(zu)織標本,稱(cheng)取重量0.5mg,加入500ul 的(de)PBS,用手工或(huo)勻漿器,或(huo)超聲(sheng)破碎儀(yi)將標本勻漿,以(yi)2000-3000

rmp離心20 分鐘,收(shou)集上清進行檢測。

7. 樣品中不能含有(you)NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶(mei)的(HRP)活性。

8. 保存(cun):如果樣品不(bu)能立即(ji)檢測,應(ying)將其分裝,-70 ℃保存(cun),避免反復(fu)冷凍。保存(cun)過程中如出現沉淀,應(ying)再次(ci)離心。血液標(biao)

本盡(jin)可(ke)能的(de)不(bu)要(yao)使(shi)用溶血(xue)或(huo)高血(xue)脂血(xue)。如果血(xue)清中含(han)大量顆粒(li),檢測前先離心或(huo)過(guo)濾(lv)。不(bu)要(yao)在37℃或(huo)更高的(de)溫度加(jia)熱解

凍(dong)。應在(zai)室溫下解凍(dong)并(bing)確保(bao)樣品均勻地充分(fen)解凍(dong)。

操作步(bu)驟:

1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分(fen)鐘。

2. 分(fen)(fen)組:取出 96 孔板(ban),根據待測樣品數量(liang)加上標(biao)準品的數量(liang)決定(ding)所(suo)需的板(ban)條數,把剩余(yu)的板(ban)條繼(ji)續冷藏處理(li)。分(fen)(fen)別設標(biao)準

品組(6 個濃(nong)度)、空白孔、待(dai)測樣品組。

注:為(wei)減少實驗(yan)誤差,保(bao)證準確(que)性,建議設置復孔(kong)。

3. 加樣:依照標準(zhun)品(pin)的順序分(fen)別(bie)加入(ru)(ru) 50ul 的標準(zhun)品(pin)溶(rong)液于空白微孔中(zhong);空白對照孔加入(ru)(ru) 50ul 的蒸餾(liu)水;其(qi)余微孔中(zhong)加入(ru)(ru) 50ul

的待測樣本。

4. 加酶(mei)標(biao)溶(rong)液:標(biao)準品組(zu)、待測樣本組(zu)各孔(kong)中加入 100ul 的酶(mei)標(biao)溶(rong)液(空白對(dui)照孔(kong)除外)。

5. 溫育(yu):酶標板(ban)用封板(ban)紙密封后(hou),放入濕盒內(nei)于(yu) 37℃恒溫孵育(yu) 1 小時。

6. 洗板:用稀釋后的(de)洗滌液(ye)注滿每孔,靜置 15-30s,充分(fen)清(qing)洗酶標板 5 次,用吸水紙徹底拍干(gan)。

7. 顯(xian)色:各孔加入顯(xian)色劑(ji) A 液 50ul 后(hou),再加入顯(xian)色劑(ji) B 液 50ul。

8. 終止(zhi):25-37℃下避光反應(ying) 10-15 分鐘(zhong),加入 50ul 終止(zhi)液。

9. 讀板:在 450nm 波長讀取各(ge)孔(kong)的 OD 值。

注(zhu)意事項:

1. 實驗操作(zuo)中必須使用一次性吸(xi)頭,避免(mian)交叉污染。

2. 加(jia)樣:加(jia)樣時,要控(kong)制加(jia)樣速(su)度,避免**孔與最后(hou)一孔間(jian)的(de)時間(jian)間(jian)隔(ge)過大,否則將(jiang)會(hui)導致不同的(de)預孵(fu)育時間(jian),從而影(ying)響

實(shi)驗的準確性以及重復性。

3. 孵育(yu):嚴格(ge)按照說明書上規定的(de)孵育(yu)時間和溫度進行。

4. 反(fan)(fan)應時間的(de)控制:加入(ru)底(di)物后請定時觀(guan)察反(fan)(fan)應孔的(de)顏色變化,如果顏色較深,請提前加入(ru)終(zhong)止液(ye)終(zhong)止反(fan)(fan)應。

5. 建議實驗(yan)前預測樣(yang)品含量,如樣(yang)品濃度過高(gao),應(ying)對樣(yang)品進行稀(xi)釋,計算(suan)結果時乘(cheng)以相(xiang)應(ying)的(de)稀(xi)釋倍(bei)數。

6. 建議使用本(ben)試劑盒時先做預實驗(即先做標(biao)準曲線,試用幾個標(biao)本(ben)),如果對(dui)本(ben)試劑盒有任何疑問(wen),可和所購經銷商聯系,

如果因運輸過(guo)程導致試劑盒失(shi)效,可要求(qiu)調換,但(dan)概不承擔(dan)產品本身(shen)以外的任何損(sun)失(shi)。

性(xing)能

1. 靈(ling)敏度:最小的檢(jian)測濃度小于1號標準品。稀釋度的線(xian)(xian)性。樣品線(xian)(xian)性回歸與預期(qi)濃度相關系數R值(zhi)為0.990。

2. 特異性:不與其它細胞因子(zi)反應。

3. 重復性:板(ban)內、板(ban)間(jian)變異系數均小(xiao)于10%。

結(jie)果(guo)判斷與分析

1、儀器值:于波(bo)長(chang)450nm的酶標儀上(shang)讀取各(ge)孔(kong)的OD值

2、以吸(xi)光度(du)OD值為(wei)縱坐標(biao)(Y),相(xiang)應的(de)(de)待(dai)測(ce)物質標(biao)準(zhun)品濃度(du)為(wei)橫坐標(biao)(X),做得(de)相(xiang)應的(de)(de)曲(qu)線,樣品的(de)(de)待(dai)測(ce)物質含量可根據(ju)其(qi)OD值由標(biao)準(zhun)曲(qu)線換算(suan)出相(xiang)應的(de)(de)濃度(du)。






買家數量成交時間
正品(pin)保障

確保(bao)所有產品都是原(yuan)裝正品

優質服務

優質服務,售后無憂

安全包裝

統一包裝,保(bao)障產(chan)品安全運輸

正規發票

機打發票,附箱送達

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